Qiagen의 공백을 메워주는 Beijing Aidelai Company의 식물 RNA 추출 키트는 사용하기 매우 쉽고 비교적 잘 팔립니다!
이제 참고하실 수 있도록 몇 가지 정보를 드렸는데요, 도움이 되셨으면 좋겠습니다
퀴아젠의 식물 RNA 추출 키트로 부족한 부분을 채워보세요
일반 기업에서는 많은 다당류 페놀 식물 RNA 추출 키트의 실패 이유와 해결책
많은 식물 RNA 샘플에는 다량의 다당류, 폴리페놀, 대사 산물, 색소 및 기타 성분이 포함되어 있어 추출 과정에서 산화, 갈변 및 분해를 유발합니다. RNA 추출 과정은 식물 종의 다양성으로 인해 상황이 더욱 복잡해집니다. 수동 CTAB 클래스 방법 추출은 시간이 너무 많이 걸리고 번거롭기 때문에 수동 방법은 논의되지 않습니다. Qiagen, Promega 등의 수입 키트를 포함하여 식물 RNA 추출에 대한 과학 연구자의 요구 사항을 충족할 수 없는 좋은 키트는 없습니다.
식물 RNA를 성공적으로 추출하지 못하는 이유를 분석해보자:
시중에서 가장 많이 사용되는 RNA 추출 키트는 크게 두 가지 종류에 불과하다. 첫 번째: TRIzol 개량법( 용액형, 스핀컬럼형 포함), 두 번째 유형 : 컬럼(스핀컬럼)을 통한 직접 절단 방식
첫 번째 키트의 실패 이유 1 : RNA 시장에서 가장 대중적인 방법은 TRIzol이다 , 또는 수정된 TRIzol 또는 TRIzol + 스핀 컬럼과 같은 개선된 방법. TRIzol은 구아니디늄 이소티오시아네이트/페놀/클로로포름 원리를 기반으로 한 원스텝 방식으로, 동물유래 조직세포에 가장 적합한 추출법으로, 일반 다당류와 폴리페놀 함량이 낮은 식물 유래 소재의 경우에도 TRIzol 기반 제품을 추출할 수 있습니다. 그러나 다당류, 폴리페놀 및 2차 대사산물이 풍부한 경우 TRIzol 방법은 RNA/DNA 상 분리에 대한 다당류 및 폴리페놀의 간섭을 방지할 수 없으며 다량의 DNA 또는 다량의 다당류, 폴리페놀 또는 2차 대사산물이 남아 있습니다. 산화는 RNA를 파괴하거나 잔류 다당류, 폴리페놀, 색소 대사산물 등이 하류 역전사 및 기타 반응을 억제합니다. 기술적인 한계로 인해 시중에 나와 있는 대부분의 국내 제조사들은 스핀 컬럼 추가 여부에 관계없이 개선을 위해 TRIzol 방식을 사용하고 있습니다. 그러나 실제로는 개선이 문제를 근본적으로 해결할 수 없다는 것이 입증되었습니다. 키트가 이 변형된 방법을 사용하는지 여부를 결정하는 것은 매우 간단합니다. 용해 용액에 페놀 냄새가 포함되어 있고 클로로포름을 사용하는지 여부는 TRIzol 방법을 개선한 것입니다.
두 번째 키트의 실패 이유: 컬럼을 통해 직접 절단하는 방식은 현재 가장 발전된 방식이지만, 기술적인 내용도 가장 높은 방식이다. 이 방법은 용해용액(페놀, 클로로포름이 없는)을 사용하여 동시에 컬럼을 통해 RNA/DNA를 직접 절단한 후 컬럼에서 직접 RNA/DNA를 분리하는 방법이므로 이 방법의 첫 번째 장점은 사용이 필요 없다는 점입니다. 페놀 하에서 RNA/DNA를 성공적으로 분리할 수 없다는 두 번째 단점은 독성이 있는 페놀 클로로포름을 사용하지 않는다는 것입니다. 하지만 기술력이 뛰어나기 때문에 수입업체를 포함해 국내 제조사들은 아직 극복하지 못한 두 가지 기술적 어려움을 안고 있다. 먼저, 다당류와 폴리페놀을 제거하기 위한 용해액의 성분을 개발해야 하며, 다당류와 폴리페놀을 제거하기 위해서는 대사산물의 성분을 첨가해야 한다. 그렇지 않으면 추출을 방해하는 다당류와 폴리페놀 문제도 직면하게 됩니다. 둘째, 직접 컬럼 방식에서는 흡착 컬럼에 DNA/RNA가 동시에 첨가되는 원리가 TRIzol과 다릅니다. DNA를 제거하는 방법이 첫 번째 어려움입니다. 그렇지 않으면 많은 양의 DNA가 남게 됩니다. 두 가지 기술적 어려움을 극복하지 못해 국내 기업이 포함시킨 두 번째 키트가 실패했습니다. 외국 기업이 첫 번째 난이도를 마스터하지 못했기 때문에 다당류와 폴리페놀 성분이 용해 용액에서 제거되지 않아 Qiagen의 RNeasy 식물 미니 키트는 블랙커런트, 홀리 및 기타 식물 샘플과 같은 더 복잡한 식물 RNA 샘플을 성공적으로 추출하지 못하는 경우가 많습니다.
Beijing Adelaide Biotech의 R&D 인력은 3년간의 지속적인 연구개발과 개선 끝에 다당류와 폴리페놀 식물의 특성과 이 두 키트의 실패 이유를 바탕으로 세계 최고의 RN09 EASYspin을 개발했습니다. 식물 RNA 급속 추출 키트는 첫째, 직접 컬럼 방식을 채택하고 클로로포름 원리 방식인 TRIzol 페놀을 완전히 버리고 무독성 원료를 사용하며 독립적인 지적 재산권을 가진 다당류 및 폴리페놀 성분을 추가하여 다당류 및 폴리페놀 대사물의 문제를 해결합니다. RNA 분리를 손상시키고 방해합니다. 둘째, 컬럼을 직접 통과함으로써 DNA 제거의 기술적 어려움을 극복하고 과도한 DNA 잔류 문제를 해결합니다.