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플라스미드 구축으로 회사가 자신의 PCR 증폭 연결 결과와 같은 유전자를 합성할 수 있을까

플라스미드 구축은 회사가 자신의 PCR 증폭 연결 결과와 다른 유전자를 합성할 수 있게 했다.

알 수 없는 서열을 시퀀싱하면 PCR 을 통해 전체 유전자를 증폭시킬 수 있지만, 현재 시퀀싱의 기술적 제한으로 인해 DNA 단편의 양끝에 있는 서열은 측정할 수 없고, 직접 PCR 산물 시퀀싱의 결과는 유전자의 중간 부분만을 얻을 수 있다.

그래서 세균의 T-벡터를 이용하여 TA 복제를 하고, 유전자를 플라스미드에 통합하여 증폭시킨 다음, 플라스미드에 있는 프라이머로 PCR 을 하여 전체 목적 유전자를 새로운 PCR 생성물의 중간 부분으로 만들어 전체 목적의 전체 길이 서열을 얻을 수 있다.

또한 PCR 증폭에 평균 1000 개의 염기마다 두 가지 오류가 있어 충실도가 세균 체내 복제보다 훨씬 낮다.

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