목적 페니실린나트륨의 무균성 검사방법을 확립하고 개선하여 검사결과의 정확성과 신뢰성을 확보하는데 있다.
방법 : 막여과법을 사용하였다.
1. 배양액 및 그 제조방법
배지는 호기성균, 혐기성균 또는 진균의 증식에 적합한 것이어야 하며, 다음 처방에 따라 제조할 수 있다. 또는 이 처방에 따라 사용할 수 있습니다. 규정을 준수하기 위해 생산된 탈수 배지입니다. 다음 배지를 준비할 때 모두 115°C에서 30분간 멸균했습니다. 1. 호기성 및 혐기성 세균배양배지(티오글리콜산액배지), 카세오펩톤(트립신가수분해물) 15g, 염화나트륨 2.5g, 포도당 5g, 새로 제조한 0.1% 레자주린액 1.0ml, L-시스틴산 0.5g(또는 0.5ml의 새로 제조한 0.2% 메틸렌블루액), 티오글리콜산나트륨 0.5g, 한천 0.5~0.7g(또는 티오글리콜산 0.3ml), 물 1000ml, 효모추출분말 5g(포도당과 레자주린액 제외)을 물에 넣고 녹인다. 약간의 온도에서 pH를 약알칼리성으로 조정하고 끓여서 여과한 후 포도당과 레자주린시액을 넣고 잘 흔들어서 멸균한 후 pH를 7.1±0.2로 조정하고 분취하여 멸균한다. 시험품을 접종하기 전에 배양액 지시약의 산화층의 색이 배양액 깊이의 약 1/5을 초과하지 않아야 하며, 그렇지 않은 경우에는 수욕에서 끓여서 가열해야 하며, 한번 가열해 보세요.
2. 선택배지
(1) 파라아미노벤조산배지(술폰아미드계 약물의 무균시험에 사용) 상기 호기성균과 혐기성균의 배양 염기 및 진균배지 조제방법에 각각 파라아미노벤조산 0.125g을 첨가하여 녹인 후 잘 흔들어서 멸균한다. (2) 폴리소르베이트 80배지(유성의약품의 무균성시험에 사용) 상기 호기성균배양액, 혐기성균배양액, 진균배양액의 처방 및 조제방법에 따라 폴리소르베이트 80을 각각 10ml씩 넣고 흔들어 균질화시킨 후, 분취하고 소독합니다.
3. 조작
의약품에 규정된 방법에 따라 처리한 후, 0.9% 멸균염화나트륨용액 또는 기타 적당한 용제를 100ml 이상 첨가하고 혼합하여 멤브레인을 설치한다. 0.45μm 이하의 공극 크기로 여과한 다음, 양성 대조균이 정상적으로 성장할 때까지 0.9% 멸균 염화나트륨 용액 또는 기타 적절한 용액으로 필터막을 헹구십시오. 호기성균, 혐기성균 배양액, 양성대조군을 이용하여 진균배양액을 멤브레인 필터(밀폐형 필터)에 각각 첨가하거나, 멤브레인 필터를 꺼내어 3등분하여 위의 2가지 배양액을 각각 첨가하고, 지정된 온도와 시간에 따라 배양합니다. 양성대조시험관에는 시험제품의 특성에 따라 해당 대조균액 1ml를 첨가한다.(대조균은 항균제, 황색포도상구균을 사용하고, 대조균은 항혐기성약물, 클로스트리듐스포로제네스를 사용하고, 대조균은 항혐기성약물을 사용한다.) 항진균제인 칸디다 알비칸스(Candida albicans)가 대조군 박테리아)로 사용됩니다. 양성대조군 튜브의 세균은 24~48시간 배양하고, 진균은 세균 증식이 일어나기 전 24~72시간 배양해야 한다. 결과판단: 양성대조군이 혼탁하고 세균 증식이 실제로 존재하며, 음성대조군이 음성인 경우 관찰된 결과를 토대로 판단할 수 있습니다.
호기성 세균, 혐기성 세균, 진균 배양 튜브가 모두 투명하거나 탁하지만 세균 증식이 없는 것으로 입증되면 결과가 명확하다고 판단되는 경우, 호기성 세균이 있으면 적격으로 판정해야 합니다. 필수 혐기성균 및 진균 배양액 튜브 중 어느 하나라도 탁하고 세균 증식이 확인된 경우에는 다시 검체량의 2배를 채취하여 법에 따라 재검사하여야 하며, 양성대조군을 제외하고는 세균이 존재하지 않습니다. 다른 튜브에서는 성장이 허용됩니다. 그렇지 않으면 테스트 제품은 부적합한 것으로 간주됩니다.
논의 현재 항생제는 널리 사용되고 있으며, 특히 항생제별로 엄격한 품질기준을 확립하고 품질을 향상시키는 것이 중요하다. 따라서 신품종에 대한 무균성 검사방법을 정할 때에는 특히 그 방법의 검증이 필요하다. 막여과법은 무균 검사 방법 중 정확성, 편리성, 속도 등의 장점을 가지고 있으며 무균 검사에 사용되는 중요한 방법입니다. 테스트 결과 위의 방법은 작동하기 쉽고 정확한 결과가 있는 것으로 나타났습니다. 따라서 이러한 무균 검사 방법의 검증은 결과의 신뢰성과 정확성을 확보하는데 큰 의미가 있습니다.