1. 메틸녹색과 피로홍: 실험원리: 메틸록과 피로홍 두 가지 염색제는 DNA 와 RNA 에 대한 친화력이 다르다. 메틸녹색은 DNA 를 녹색으로, 피로홍은 RNA 를 붉은색으로 만든다. 메틸녹색, 피로홍 혼합염색제를 이용하여 세포를 염색하면 DNA 와 RNA 가 세포에 분포되어 있음을 알 수 있다. 시약 및 조제 방법 (1) 화학 시약 상점에 피라홍 메틸 그린 혼합 가루가 없는 경우 메틸록과 피로홍 G 를 별도로 구입한 다음 A 액의 두 번째 방법으로 조제할 수 있습니다 (아래 참조). (2) 염색제의 조제 ① 염색제 A 액의 두 가지 조제 방법 첫 번째 방법: 피로레드 메틸록가루 1 g 를 100 mL 증류수에 넣고 녹인 다음 여과지로 여과하여 갈색 병에 필터를 넣어 준비한다. 두 번째 방법: 메틸그린 2 g 는 98 mL 증류수에 용해되고, 피라레드 G 5 g 는 95 mL 증류수에 용해된다. 6 mL 메틸 그린 용액과 2 mL 피로홍 용액을 16 mL 증류수, 즉 A 액으로 갈색 병에 넣어 준비한다. (참고: 핵산 염색에 쓰이는 것은 피로홍 G 입니다. 피로홍 B 를 잘못 사지 마세요. ) ② 염색제 B 액의 조제 방법 B 액은 아세틸산 나트륨과 아세트산이 혼합된 완충액이다. 먼저 아세테이트산 나트륨 16.4 g 를 취하여 증류수로 1,000ML 예비로 녹인다. 아세트산 12 mL 을 다시 받아 증류수로 1,000ML 까지 희석한다. 조제된 아세테이트나트륨 용액 30 mL 과 희석된 아세트산 20 mL, 증류수 50 mL, pH 4.8 의 B 액 (완충액) 을 넣는다. ③ 염색제의 조제 염색제는 A 액과 B 액의 혼합으로 만든 것이다. A 액 20 mL 과 B 액 80 mL 을 섞은 것은 실험에 사용된 피로홍메틸 녹색 염색제이다. 주목해야 할 것은 이 시약 현황이 활성화되어야 한다는 것이다. 2. 용담보라색과 초산자홍: 염색질 (체) 은 알칼리성 염료에 의해 어둡게 물들기 쉽다. 염색제로는 두 가지 조건이 있어야 합니다. 하나는 색깔이 있어야 합니다. 두 번째는 감염된 조직과 친화력을 갖는 것이다. 염료의 색깔과 조직과의 친화력은 염료 자체의 분자 구조에 의해 결정되며, 색깔을 생성하는 발색기와 조직간의 친화력을 생성하는 보조기단 * * * 은 염색제의 염색 성질을 결정한다. 염료 물질로, 발색기단 외에 화합물을 전리시키는 보조기단이 필요하다. 염색제의 산, 알칼리성 정의는 염료 용액의 pH 값에 의해 결정되는 것이 아니라, 염료 물질 중 보조기단이 이온화된 후 가져온 전하에 따라 결정된다. 일반적으로 보색기단에 양전하를 띠는 염색제는 알칼리성 염색제이고, 그 반대는 산성 염색제이다. 아세테이트의 선홍색은 종종 핵, 염색체의 고정과 염색제로 쓰인다. 끓는 45% 아세트산에 마젠타를 넣어 포화시킨 다음, 미량의 철이온을 첨가하면 초산 마젠타 재료가 초산에 고정되어 있는 동안 마젠타가 핵이나 염색체를 붉은색으로 염색한다. 용담자색으로 염색체를 청보라색으로 염색할 수 있다. 3. 이홍미블루: 이홍과 미블루는 두 가지 아닐린 염료로 그람 양성균의 성장을 억제할 수 있다. 동시에, 이 염료들은 유당을 발효시키는 미생물들을 구분할 수 있다. 대장균군은 유당을 강하게 발효시켜 대량의 혼합산을 만들어 균체 표면에 양전하를 띠게 하고, 이홍색 염료에 물들고, 이홍과 미청색이 결합되고, 균체는 짙은 보라색으로 덮여 있고, 두 가지 염료가 보라색으로 함유된 배양기에 코어와 금속광택이 있는 균락을 형성한다. 그래서 이홍과 미블루로 그람 음성균 (대장균) 의 존재를 확인할 수 있다. 4. 디 페닐 아민: 디 페닐 아민은 무극성 방향족 유기 분자로, 유독하며, 융점은 물보다 낮고, 물에 약간 용해되며, 알코올, 빙초산 및 기타 유기 용매에 쉽게 용해됩니다. 화학적 성질이 활발하여 빛을 만나면 변색되기 쉽다. 그래서 어두운 곳에 두어 보관해야 한다. 디 페닐 아민 시약 식별 DNA 의 원리: DNA 분자의 데 옥시 리보스는 산성 환경에서 오메가-하이드 록시-γ-케톤 글루 타르 알데히드를 생성하고 디 페닐 아민 시약 (DNA) 과 결합하여 청색을 나타냅니다. 색상의 깊이는 용액의 DNA 함량에 비례합니다.
디 페닐 아민 시약 준비: A 액: 1.5 그램의 디 페닐 아민은 100ml 빙초산에 용해되며 1.5ml 진한 황산 (여기서 진한 황산의 역할은 강한 산화제로 시약 안정성을 유지할 수 있음) 을 첨가하고 준비한 A 용액은 갈색 병에 보관됩니다. B 액체: 부피 점수가 0.2 인 아세트 알데히드. 아세트알데히드는 복원성 시약 이기 때문에 실험 전에 A 액과 B 액을 혼합해서는 안 된다. 동시에, 디 페닐 아민 시약 성질은 불안정하고 변색되기 쉽기 때문에 현재 작동하는 것이 좋습니다. 5. 쌍축소: 생물조직에 단백질이 함유되어 있는지 확인할 때 흔히 사용되는 쌍축법에는 쌍축소 시약, 쌍축소 반응이 발생한다. (알버트 아인슈타인, Northern Exposure (미국 TV 드라마), 건강명언) 뷰렛 반응의 본질은 알칼리성 환경에서 구리 이온과 뷰렛 시약 사이에 발생하는 보라색 반응이다. 단백질 분자에는 이중 뷰렛 (H2NOC-NH-ConH2) 구조와 유사한 펩타이드 결합이 많이 포함되어 있으므로 단백질은 이중 뷰렛 시약 (biurea urealyticum) 와 색상 반응을 일으킬 수 있으며, 단백질의 존재는 뷰렛 시약 (biurealyticum) 으로 식별 될 수있다. 6. 필린 시약: 수산화나트륨의 질량점수가 0.1 g/mL 인 용액과 황산구리의 질량점수가 0.05 g/mL 인 용액, 타르타르산 칼륨나트륨이 배합된 용액입니다. 그것은 용해성의 복원성 설탕 (포도당), 과당, 말토당과 함께 가열 조건 하에서 벽돌색의 산화아동침착을 생성할 수 있다. 따라서 필린 시약 (Fillin Foundation) 은 용해성 환원당의 존재 여부를 확인하는 데 자주 사용된다. 7. 반씨 시약: 반씨 시약 () 는 요당 감정 () 에 자주 쓰이며, 그 레시피는 필린 시약 () 와는 달리 1 ①400ml 물에 85g 레몬나트륨과 50g 무수탄산나트륨을 넣는다. ②50ml 가열된 물에 8.5g 무수황산동을 넣는다. 용액을 만들다 ③ 용액을 구연산 나트륨 용액에 붓고, 침전이 생기면 걸러낼 수 있다. (2) 반응 원리는 피린 시약 (feilin principles) 와 약간 다르다. 피린 시약 검진을 이용할 때, 피린 시약 갑과 피린 시약 을은 직접 반응 생성 및 용해성 환원당 반응으로 벽돌색 침전이 발생한다. 반씨 시약 중 발생하는 것은 레몬산 나트륨과 탄산나트륨이 모두 강한 알칼리 약산염으로, 물속에서 모두 가수 분해되어 레몬산 나트륨 용액과 용액을 섞을 때 결합하여 포도당의 알데히드 반응과 함께 벽돌색 침전을 생성한다는 것이다. (3) 두 시약 모두 보존 방식이 다르다. 필린 시약 갑과 필린 시약 을은 강하게 생겨 쉽게 침전되기 때문에 필린 시약 은 일반적으로 활성 현배이다. 반씨 시약 레시피 중 레몬산나트륨은 한 쌍의 완충물질로 생성되는 수량이 제한되어 용액과 섞이면 농도가 상대적으로 낮아 석출이 쉽지 않아 시약 장기 보존이 가능하다.