고온으로 미생물을 죽이는 방법. 가열 멸균 원리: 고온이 미생물에 작용할 때 먼저 세포 내 생리생화반응률이 빨라지고, 체내에 온도에 민감한 물질 (예: 단백질, 핵산 등) 이 온도가 높아지면서 돌이킬 수 없는 손상을 입게 된다. 결국 원질체의 변화와 세포 내 효소 구조의 파괴로 인해 세포가 생명기능의 조화를 잃고 성장발육을 멈추게 된다. 고온의 지속적인 작용으로 세포 내 원생질이 응고되고, 효소 구조가 완전히 파괴되고, 활성이 사라지고, 생화학반응이 멈추고, 침투 교환 등 대사활동이 사라지고, 세포가 죽는다. 가열 살균은 건열 살균과 습열 살균으로 나눌 수 있다.
1) 건열 살균은 연소나 건열 공기를 이용하지만 포화증기가 없는 멸균 방법을 건열 살균이라고 합니다. 건열 살균은 사용이 편리하고 방법이 간단하기 때문에 생산에 널리 사용된다. 예를 들어, 화염 멸균법: 미생물은 화염에 직접 타 죽기 때문에 소각멸균법이라고도 합니다. 이 방법은 철저하고 빠르지만 금속 접종 도구, 시험관 입, 오염물 처리에만 적용된다. 열풍멸균법: 즉 전열 항온 건조함에서 건열풍으로 멸균하는 것이다.
2) 습열 살균은 증기를 통해 멸균하는 방법이다. 습열 살균은 고압, 상압, 간헐 멸균, 저온 살균의 네 가지 유형으로 나눌 수 있다.
① 고압 증기 멸균은 고압 증기 관통력이 강하여 온도가 상압보다 높기 때문에 멸균 시간을 크게 단축하고 업무 효율을 높일 수 있다. 또한 단백질은 습한 조건 하에서 쉽게 변성된다. 뜨거운 증기 조건 하에서 20 ~ 30 분 후에120 C 는 세균 포자를 모두 죽일 수 있다. 멸균물질이 너무 커서 관통하기 쉽지 않으면 압력을 0. 152 MPa 로 올려 1 ~ 2 시간으로 연장할 수 있습니다. 고압 증기 멸균에서 멸균 온도는 증기 압력이 증가함에 따라 증가한다 (그림 2-6).
그림 2-6 고압 증기 멸균기
고압 멸균기를 사용할 때는 고압 멸균기 안의 공기를 완전히 배출하고 포화증기로 대체해야 한다. 공기가 깨끗하지 않으면 냄비 안의 온도가 동압 하의 순포화 증기에서 나오는 온도보다 낮아 살균 효과에 영향을 준다.
이 방법은 일반 배양기, 생리염수 등 용액, 유리그릇, 작업복 등 각종 내열 물품의 멸균에 적용된다. 사용되는 증기 압력과 시간은 멸균할 물건의 성질, 부피, 용기 유형에 따라 결정해야 한다.
(2) 대기압 증기 멸균은 자연압력과 증기를 이용하여100 C 에서 멸균하는 방법이다. 그 설비는 간단하고, 원가가 낮으며, 현재 가장 널리 사용되고 있다. 난로를 만들고, 1 ~ 2 큰 냄비를 사고, 벽돌과 시멘트로 만든 것도 큰 철통, 나무통 등으로 만들 수 있습니다. 크기는 스스로 결정할 수 있지만 너무 클 수는 없다. 800 ~ 1500 병을 포장하는 것이 좋습니다. 상압 냄비를 설계할 때 주의해야 할 문제: 크기는 생산 규모에 따라 냄비 상단을 아치형으로 만들어 냉수가 냄비 내벽을 따라 흘러내려 면마개를 적시지 않도록 하는 것이 좋다. 주방의 캐비닛에는 선반 구조가 있어야 층층이 살균을 할 수 있다. 난로에 온도계를 설치하고 난로 안의 온도 변화를 수시로 관찰해야 한다. 살균 시간이 길어서 냄비의 물이 증발하지 않기 때문에 대용량 난로에 물을 넣는 장치를 설치해야 한다. 아궁이의 밀봉도는 가급적 높아야 하며 살균 효과도 높이고 연료도 절약해야 한다. 버섯 재배자들은 종종 생산에 소형 증기 발생기를 사용한다. 증기를 뽑은 후 바로 바닥으로 흘러들어가 나무줄기가 있고 다층 플라스틱 천으로 밀봉된 균포더미에서 상압멸균을 한다. 이 방법은 난로를 만들 필요가 없고, 간단하고 수월하다 (그림 2-7). 상압멸균은 보통 물이 끓은 후 8 ~ 10 시간 동안 지속되어 하룻밤 동안 답답할 수 있다.
그림 2-7 간단한 대기압 살균 방법
(3) 상압 간헐 증기 멸균법은 상압 증기로 반복적으로 멸균하는 방법이다. 구체적인 방법은 멸균될 물건을 냄비에 넣고 1 00 C 에서 약1시간을 처리하여 미생물의 영양세포를 죽이고 30 C 정도로 식히면 포자가 싹트고 같은 방법으로 세 번 가열하는 것이다. 이 방법은 내고온을 견디지 못하는 약, 영양물질, 특수 배양기의 멸균에 사용할 수 있다.
(4) 저온 바씨 살균, 즉 60 ~ 70 C 에서 일정 시간 후에 유해 미생물을 죽이는 방법. 고온에 견디지 않는 물건의 소독에 적합하다. 일부 배양기는 고온에서 파괴될 수 있다. 이 방법은 병원 미생물의 영양체를 죽일 뿐만 아니라 배양기의 성분이 심각하게 파괴되는 것을 막을 수 있다. 식용 균류 생산에서 배양재의 누적 발효 과정은 이 원리를 이용하여 병, 벌레, 잡균을 죽이는 것이다.
(2) 여과 멸균법
액체 여과와 공기 여과의 두 가지 종류로 나뉜다. 즉, 기계적인 방법으로 필터 구멍이 세균보다 작은 체를 설계하여 각종 필터를 만든다. 기계적 필터링을 통해 액체 배양기나 공기만 체공에서 흘러나오고 각종 미생물 세포는 체에 남아 멸균 목적을 달성한다. 이 방법은 액체 배양기 (예: 동물혈청, 단백질, 효소, 비타민 등) 의 멸균에 적용된다. ) 그리고 열 불안정 가스. Clean bench 는 세균이 있는 공기를 필터링, 살균, 무균 공기를 형성하여 풍동에서 불어와 작업대 범위 내에서 무균 상태를 만드는 방식으로 작동한다. 여과멸균의 가장 큰 장점은 배양기 중 각종 물질의 화학성분을 파괴하지 않는다는 것이다. 일반적으로 사용되는 필터로는 규조토, 석면, 도자기 토양, 불솜 접착제, 질산섬유소 여과막 등이 있다.
(3) 방사선 살균 방법
방사선에 의해 생성 된 에너지를 사용하여 멸균하는 방법을 방사선 멸균이라고합니다. 방사선은 전리 방사선과 비 전리 방사선으로 나눌 수 있습니다. 알파, 베타, 감마선, X 선, 중성자, 양성자, 마이크로웨이브는 모두 전리 방사선이고 자외선, 오존, 햇빛은 모두 비전리 방사선이다.
1) 자외선 살균 자외선 살균의 원칙은 자외선을 이용하는 것이다. 전등으로 세균을 직접 비추면 광화학반응이 일어나 세균 세포질에서 흉선 이합체의 형성을 유도해 DNA 복제를 억제하고 트랜스젠더사망을 일으킨다. 한편, 자외선에 공기가 비추는 오존 (O3) 도 일정한 살균 작용을 한다. 자외선의 유효 범위는 1.2 ~ 2.0 미터이다. 일반적으로 접종실이나 배양실 위에 자외선등을 매달는데, 그 수는 방 크기에 따라 다릅니다. 1 ~ 2 인 접종실에는 30 와트 자외선등을 설치할 수 있습니다. 매번 접종하기 전에 필요한 모든 기구를 함께 접종실 (상자) 에 넣고 자외선등을 켜서 비춰야 한다. 접종실이 크면 2 시간 동안 불을 켜야 멸균 효과를 얻을 수 있다. 작다면 30 분 정도 불을 켜면 살균 효과를 얻을 수 있다. 자외선의 관통력이 약하기 때문에 일반 유리조차도 여과할 수 없기 때문에 공기나 물체 표면의 살균에만 적용된다. 자외선은 인체 피부, 특히 눈을 죽일 수 있으므로 똑바로 쳐다보지 말고 일할 때 자외선등을 꺼야 한다. 자외선을 소독할 때 직장이 약간 어두운 경우 살균 효과를 높일 수 있다. 세균은 치명적인 자외선을 받으면 바로 가시광선에 노출되며, 어떤 세균은 부활할 수도 있다. 줄기세포는 습세포보다 자외선에 더 내성이 있고, 포자는 영양세포보다 자외선에 더 내성이 있다.
2) 마이크로웨이브 살균은 미생물 세포에 70 ~ 90% 의 수분이 함유되어 있어 물 분자가 마이크로웨이브 전기장에서 극화되어 전기장 방향의 변화에 따라 회전한다. 회전 과정에서 분자간 고속 마찰은 열을 생성하는데, 외부 가열과는 달리 세포가 단시간 내에 폭발할 수 있지만 물체 자체의 온도는 약간 높아져 살균 효과를 얻을 수 있다. YM760 1 전자레인지를 사용하면 60 초 이내에 음식물 중10.92 만 대장균을 죽일 수 있다.
3) 오존 발생기 소독 오존 (O3) 은 강력한 산화 작용을 하여 미생물의 세포막과 핵산을 파괴할 수 있다. O3 은 실온에서 자연적으로 분해되어 산소로 복원될 수 있는 일시적인 물질이기도 하다. 그것의 살균 원리는 사실 자외선 소독과 매우 비슷하다.