먼저 애질런트 크로마토그래피 컬럼에는 종류가 많기 때문에 플러싱하기 전에 종류를 구별해야 합니다.
둘째, 일반 C18 컬럼, 특히 실리카겔 매트릭스를 사용하는 일반 C18 컬럼으로는 산, 알칼리, 염분, 물 등이 모두 컬럼에 손상을 주는 이동상 성분입니다. (AQ가 포함된 순수 물기둥을 제외하면 일반적으로 모든 브랜드에 이 방수 기둥이 있습니다.) 개인적으로 이동상에 물이 80% 이상이면 C18의 수명이 단축된다고 생각합니다. . 따라서 높은 수용성상의 이동상 분석 시 적합한 컬럼 선택에 주의하시기 바랍니다. 산으로 인한 컬럼 손상은 되돌릴 수 없으므로 pH를 조절해야 한다고 개인적으로 생각합니다. pH가 2 미만이면 컬럼을 낭비할 준비가 되어 있어야 합니다. 알칼리성 조건은 실리카 기반 C18의 약점입니다. 일반적으로 실리카 기반 C18의 알칼리성 조건은 내구성이 좋지 않습니다. 그러나 알칼리성 PH11 컬럼도 있지만 가격이 더 비쌉니다. 크로마토그래피 컬럼에 대한 소금의 영향은 주로 소금 침전으로 인해 발생하며 이는 치명적입니다.
세 번째 플러시 방법에 문제가 있습니다. 세척 방법은 사용된 이동상과 시료의 세척 방법에 따라 구별되어야 합니다. 일반적으로 산, 알칼리염을 첨가하지 않고 수상도가 높지 않은 경우(예: 메탄올과 물의 비율 60:40) 플러싱의 목적은 시료의 불순물을 씻어내는 것입니다. . 이동상만 저장하면 됩니다. 산과 알칼리의 조건에서 원칙적으로 산과 알칼리는 크로마토그래피 컬럼에서 세척되어 메탄올 물에 보관되어야 합니다(예를 들어, 60:40의 비율은 사용되는 이동상을 기준으로 할 수 있습니다. 물의 위상이 높지 않은 한). 소금의 조건은 번거롭고 잘 처리하지 않으면 크로마토그래피 컬럼에 문제가 생길 뿐만 아니라 기기에도 문제가 발생합니다. 일반적으로 염분을 씻어내기 위해 고수성 이동상 메탄올-물(10:90)을 사용하고(압력에 주의) 순수 메탄올로 헹구십시오(이 단계는 고수분으로 인한 크로마토그래피 컬럼의 손상을 복원하기 위한 것입니다) 단계), 최종적으로 일반 메탄올에 보관합니다. Water 시스템이면 충분합니다.
네 번째 포인트는 플러싱 시 압력에 주의하는 것입니다. 작은 유량부터 시작해 압력이 허용하는 범위까지 천천히 유량을 높이는 것이 가장 좋습니다. 올바른 플러싱 시간은 유속입니다. 일반적으로 크로마토그래피 컬럼의 플러싱은 컬럼 부피의 10~20배에 도달해야 합니다.